GFP標(biāo)記小鼠成肌細(xì)胞;C2C12-GFP

GFP標(biāo)記小鼠成肌細(xì)胞;C2C12-GFP

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞別稱：C2c12; C2-C12; C12；小鼠成肌細(xì)胞

種屬來(lái)源：小鼠

年齡性別：

組織來(lái)源：肌肉 品系：C3H

生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)：成肌細(xì)胞

背景簡(jiǎn)介：2C12細(xì)胞是由D. Yaffe 和 O. Saxel建立的小鼠成肌細(xì)胞株的亞克隆(由H. Blau等人構(gòu)建)。C2C12細(xì)胞株分化很快，形成可伸縮的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白2(BMP-2)處理，導(dǎo)致分化途徑從成肌細(xì)胞轉(zhuǎn)換成成骨細(xì)胞。檢測(cè)表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。

生物安全等級(jí)：1

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠白介素35(IL-35)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： IL-35 ELISA Kit

Mouse ierleukin 23 (IL-23) ELISA Kit 小鼠白介素23(IL-23)檢測(cè)試劑盒

ELISA 小鼠羥脯(mouse HYP)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforINHBPELISAKit大鼠抑制素結(jié)合蛋白

通用型甘油三酯(iglyceride)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒50次

ELISAKitPROG大鼠孕激素/孕同

NEK3重組小鼠 NEK3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

層粘連蛋白β1(LAMβ1)重組蛋白 Recombinant Laminin Beta 1 (LAMb1)

TNFSF11重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

EPHB1 Protein Human 重組人 EphB1 / EPHT2 蛋白

ALCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ALCAM 蛋白

層粘連蛋白β1(LAMβ1)重組蛋白 Recombinant Laminin Beta 1 (LAMb1)

EPHB1 Protein Human 重組人 EphB1 / EPHT2 蛋白

NEK3重組小鼠 NEK3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

ALCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ALCAM 蛋白

TNFSF11重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

GFP標(biāo)記小鼠成肌細(xì)胞;C2C12-GFP小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat soluble endothelial protein C receptor (sEPCR) ELISA Kit 大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)檢測(cè)試劑盒

HumanpoiculinELISAKit 人膜橋蛋白(poiculin)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-IgAaibody檢測(cè)試劑盒人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物0脂酶D2(PhospholipaseD2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

HumanVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1,VEGFR-1/Flt1ELISAKit人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素檢測(cè)試劑盒   小鼠白介素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠白介素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠白介素試劑盒、小鼠白介素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠環(huán)0酸鳥苷檢測(cè)試劑盒   小鼠環(huán)0酸鳥苷試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠環(huán)0酸鳥苷試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠環(huán)0酸鳥苷試劑盒、小鼠環(huán)0酸鳥苷eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠骨膠原交聯(lián)檢測(cè)試劑盒   小鼠骨膠原交聯(lián)試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠骨膠原交聯(lián)試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠骨膠原交聯(lián)試劑盒、小鼠骨膠原交聯(lián)eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠骨成型蛋白受體檢測(cè)試劑盒   小鼠骨成型蛋白受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠骨成型蛋白受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠骨成型蛋白受體試劑盒、小鼠骨成型蛋白受體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。