人支氣管成纖維細胞說明書

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人支氣管成纖維細胞【HumanLung:BronchialFibroblastCells】
     人支氣管成纖維細胞說明書 產品描述：人支氣管成纖維細胞來源于正常人支氣管組織，成纖維細胞是結締組織中常見的一種細胞，可在支氣管創(chuàng)傷后修復組織。公司提供的人支氣管成纖維原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)人支氣管成纖維原代細胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據公司批準的方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司產品人支氣管成纖維細胞培養(yǎng)試劑盒(HumanLungPrimaCell™:BronchialFibroblastCellsCatNo.3-0085)來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下，人支氣管成纖維原代細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。
      保存和應用：客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。
培養(yǎng)步驟：
人支氣管成纖維細胞說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

挪威假絲酵母 Candida norvegensis地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

發(fā)根土壤桿菌 Agrobacterium rhizogenes大鼠肺成纖維細胞*培養(yǎng)基

769-P(人腎細胞腺細胞)球形節(jié)桿菌 Arthrobacter globiformis

根瘤菌 Rhizobium sp.大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

PANC-全細胞裂解液NCI-N87(人胃細胞)

赭曲霉 Aspergillus ochraceus桿菌屬 Lactobacillus sp.

雙孢蘑菇 Agaricus bisporus苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

胰凝蛋白酶(含00mL酶解緩沖液)T24, 人膀胱細胞

小鼠腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基植物桿菌 Lactobacillus plantarum

植物桿菌 Lactobacillus plantarum光帽鱗傘 Pholiota nameko

人支氣管成纖維細胞說明書6-硝并噻唑分子式：506.52884英文名稱：6- nitrobenzene and thiazole：380740分子量： C22H26N4O8S

5,7-二氧-8-羥喹啉分子式：24.05英文名稱：5,7- two hydroxy -8-：773-76-2分子量： C9H5Cl2NO

4'-(4-溴)-α,α',α''-三吡分子式：388.27英文名稱：4'- (4- Bromophenyl) - alpha, alpha ', alpha three''- pyridine：89972-76-9分子量： C2H4BrN3

,8-二溴萘分子式：285.96英文名稱：,8- dibromine naphthalene：分子量： C0H6Br2

4,7-雙(5-溴-4-十二烷-2-噻吩)-2,,3-并噻二唑分子式：794.85英文名稱：4,7- bis (5- twelve -4- -2-) -2,,3- two：79993-72-6分子量： C38H54Br2N2S3

3-甲吡唑分子式：82.英文名稱：3- methyl：453-58-3分子量： C4H6N2

6---甲脲嘧分子式：4.3英文名稱：6- amino --：2434-53-9分子量： C5H7N3O2

2-甲硫吡分子式：25.9英文名稱：2- a sulfur based pyridine：8438-38-5分子量： C6H7NS

2-乙酰-5-溴-3-甲吡分子式：229.07英文名稱：2- acetyl -5- -3-：42404-8-7分子量： C8H9BrN2O

4,5-二-,2,3-噻二唑分子式：238.3英文名稱：4,5- two -,2,3- two：5393-99-7分子量： C4H0N2S

注意事項：
. 接收到人支氣管成纖維細胞說明書，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。