人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)

注意事項：
. 接收到人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

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人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞【HumanPeritoneal:NormalPeritonealCapillaryEndothelialCells】
    人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) 產(chǎn)品描述：人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自正常人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮，呈單層扁平分布。內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細(xì)胞，由一層扁平細(xì)胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至少的微血管。公司提供的人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準(zhǔn)的方案進行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(HumanPeritonealPrimaCell™:NormalPeritonealCapillaryEndothelialCellsCatNo.3-0253)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞傳5代以上仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

根瘤菌 Rhizobium sp.NCTC 469(小鼠正常肝細(xì)胞)

CAL-27(人舌鱗細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

植物桿菌 Lactobacillus plantarum涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis

大鼠腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基植物桿菌 Lactobacillus plantarum

曲霉屬 Aspergillus sp.苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformisNeutral Balsam/中性樹膠

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum雙酶梭菌 Clostridium bifermentans

DLD-(人結(jié)腸腺細(xì)胞)中華根霉

植物桿菌 Lactobacillus plantarum人結(jié)腸氟耐藥株

莢膜放線桿菌 Actinobacillus capsulatus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)分子式：479.4英文名稱：Nitric acid：22832-87-7分子量： C8H5Cl4N3O4

,'-二硼酸二茂鐵(含有數(shù)量不等的酸酐)分子式：273.67英文名稱：,'- two, two of boric acid (containing a number of anhydride).：3284-83-分子量： C0H2B2FeO4

(銅試劑)二乙二硫代甲鈉英文名稱：(copper reagent) two ethyl two sodium benzoate分子式：7.26分子量： C5H0NNaS2：48-8-5

2-(4-tert-丁)嘧分子式：2.3英文名稱：2- (4-tert- Ding Benji)：52473-66-4分子量： C5H7N

5-溴-,3-二氟-2-異丙氧分子式：英文名稱：5- two f -,3- -2-：309933-98-9分子量：

8-羥-7-丙喹啉分子式：87.24英文名稱：8- hydroxy -7-：58327-60-9分子量： C2H3NO

4,7-雙(5-溴-2-噻吩)-2-正辛-2H-并三唑分子式：553.38英文名稱：Double 4,7- (5- bromo -2- thienyl) -2- octyl -2H- benzo triazole three：254062-4-3分子量： C22H23Br2N3S2

2-氯-3-三氟甲吡分子式：8.54英文名稱：2- -3- three：65753-47-分子量： C6H3ClF3N

TMS-PZ配件分子式：英文名稱：TMS-PZ accessories：xzs分子量：

,2-(二葵氧荃)分子式：390.64英文名稱：,2- (two oxygen Kwai Tsuen) benzene：25934-47-8分子量： C26H46O2

培養(yǎng)步驟：
人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。