人角膜成纖維細胞說明書

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人角膜成纖維細胞【HumanEyes:NormalCornealFibroblasts】
     人角膜成纖維細胞說明書 產(chǎn)品描述：人角膜成纖維細胞分離自正常人角膜結(jié)締組織，主要功能：（）成纖維細胞是結(jié)締組織中常見的一種細胞。（2）可在角膜創(chuàng)傷后修復(fù)組織。公司提供的人角膜成纖維細胞細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)人角膜成纖維細胞細胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準的方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品人角膜成纖維細胞細胞培養(yǎng)試劑盒(HumanEyesPrimaCell™:NormalCornealFibroblastsCatNo.3-0540)來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下，人角膜成纖維細胞細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務(wù)標準。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
培養(yǎng)步驟：
人角膜成纖維細胞說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

宇佐美曲霉B變種 Aspergillus usamii var. B人破骨細胞*培養(yǎng)基

黃綠鏈霉菌 Streptomyces flavoviridis嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

成纖維細胞里氏木霉 Trichoderma reesei

雜色云芝 Polystictus versicolor中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

小檗堿WERI-Rb-(人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞)

HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 Yersinia enterocolitica

解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica串珠鐮孢 Fusarium moniliforme

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum卵巢

LTEP-a-2(人肺腺細胞) 細胞名稱

泡盛曲霉 Aspergillus awamori異常漢遜酵母 Hansenula anomala

人角膜成纖維細胞說明書青陽參苷元A英文名稱：Qingyang ginseng A分子式：500.58分子量：C28H36O8：84745-94-8

四硼鈉英文名稱：Four sodium styrene分子式：342.24分子量： C24H20BNa；(C6H5)4BNa：43-66-8

羥乙咪唑分子式：英文名稱：Hydroxyethyl imidazoline：分子量：

直接凍黃G英文名稱：Direct frozen yellow G分子式：680.66分子量： C30H26N4Na2O8S：2870-32-8

3-(BOC-)分子式：200.28英文名稱：3- (BOC- amino piperidine)：72603-05-3分子量： C0H20N2O2

3-氟溴乙分子式：203.05英文名稱：3- fluorine bromine：2507-3-4分子量： C8H8BrF

雙(,3-丙二胺)氯銅分子式：282.7英文名稱：雙（,3 -丙二胺）氯銅：32270-93-2分子量： C6H20Cl2CuN4

氯二乙鋁分子式：20.56英文名稱：Two ethyl chloride：35344分子量： C4H0AlCl

六氯聯(lián)分子式：360.88英文名稱：Hexachlorobiphenyl：35065-27-分子量： C2H4Cl6

,2,3-三氟分子式：32.08英文名稱：Three - ,2,3-：489-53-8分子量： C6H3F3

注意事項：
. 接收到人角膜成纖維細胞說明書，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。