小鼠膀胱成纖維細胞說明書

注意事項：
. 接收到小鼠膀胱成纖維細胞說明書，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

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小鼠膀胱成纖維細胞【MouseBladder:NormalBladderFibroblasts】
    小鼠膀胱成纖維細胞說明書 產(chǎn)品描述：小鼠膀胱成纖維細胞分離自正常小鼠膀胱組織，膀胱成纖維細胞分泌的生長因子是一種具有多功能的促有絲分裂原，研究已表明其參與惡性腫瘤的形成過程。近年來，堿性成纖維細胞生長因子在膀胱癌發(fā)病過程中的作用、與生物學(xué)行為之間的關(guān)系以及治療上的應(yīng)用已受到重視。公司提供的小鼠膀胱成纖維細胞，采用膠原酶消化制備而來。細胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品小鼠膀胱成纖維細胞培養(yǎng)試劑盒（MouseBladderPrimaCell™:NormalBladderFibroblastsCatNo.3-4239)來優(yōu)化目的細胞生長條件，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠膀胱成纖維細胞傳0代以上仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。公司提供的細胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。?

WTRL(大鼠肺細胞)嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum巨大芽胞桿菌 Bacillus megatium

大腸桿菌 Escherichia coliL-Glutamine (00X)

串珠菌 Leuconostoc lactis金頂側(cè)耳 Pleurotus citrinopileatus

山羊豆根瘤菌 Mesorhizobium galega小鼠腸動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基

MDA-MB-23（ATCC來源）, 人腺細胞成人真皮成纖維細胞*培養(yǎng)基

糙皮側(cè)耳 Pleurotus ostreatus戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

小鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞*培養(yǎng)基ACCC4077 Nocardiopsis dassonvillei

大鼠肺大動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基C-33 A(人子宮頸細胞)

萎芽孢桿菌 Bacillus atrophaeus地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

小鼠膀胱成纖維細胞說明書-(4-)吡唑分子式：59.9英文名稱：- (4-)：7635-45-9分子量： C9H9N3

檸檬酸鉍鉀分子式：495.98英文名稱：Bismuth citrate：分子量： BiK2C6H7O7·H2O

3-羥--甲-5-三氟甲-H-吡唑分子式：66.英文名稱：3- hydroxy -- methyl -5- three -H-：9022-5-4分子量： C5H5F3N2O

2-氟-3-分子式：25.4英文名稱：2- -3- methyl aniline：978-33-2分子量： C7H8FN

,4-雙(α-羥六氟異丙)分子式：40.6英文名稱：,4- bis (alpha hydroxy six f Yi Bingji) benzene：992-5-0分子量： C2H6F2O2·xH2O

對叔丁氯分子式：68.66英文名稱：Para tert butyl chloride：3972-56-3分子量： C0H3CL

乙黃原酸鉀分子式：60.3英文名稱：Potassium ethyl potassium：40-89-6分子量： C3H5KOS2

丙正丁酯英文名稱：Butyl propionate分子式：30.8分子量： C7H4O2：590-0-2

6-溴-2-氟吡分子式：75.9英文名稱：6- bromide -2-：937379-49-2分子量： C5H3BrFN

2-巰-5-(三氟甲)吡分子式：79.6英文名稱：2- (three) -5-：7604-72-0分子量： C6H4F3NS

培養(yǎng)步驟：
小鼠膀胱成纖維細胞說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。