小鼠膀胱平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒說明書

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小鼠膀胱平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒【Mouse Bladder PrimaCell: Normal Bladder Smooth Muscle Cells】
     小鼠膀胱平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒說明書膀胱是一個儲尿器官。在哺乳類，它是由平滑肌組成的一個囊形結構，位于骨盆內，其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌，可以控制尿液的排出其中，小鼠膀胱平滑肌細胞分離自正常小鼠膀胱平滑肌組織。膀胱是由平滑肌細胞組成的中空器官。人膀胱平滑肌細胞傳0代以上仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。 雖然膀胱平滑肌組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的膀胱平滑肌組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的平滑肌組織片能使得膀胱平滑肌組織中細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將膀胱平滑肌細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)小鼠膀胱平滑肌細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的膀胱平滑肌原代細胞中成纖維細胞的含量。 小鼠膀胱平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)小鼠的膀胱平滑肌細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠膀胱平滑肌細胞組織解離液(3×ml) （2）小鼠膀胱平滑肌細胞組織處理緩沖液 (00ml) （3）FibrOutTM小鼠膀胱平滑肌細胞成纖維抑制劑 (ml（500x）) （4）小鼠膀胱平滑肌細胞組織洗液(5 x 00 ml) （5）小鼠膀胱平滑肌細胞生長因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠膀胱平滑肌細胞基礎培養(yǎng)基(5 x 00ml) （7）小鼠膀胱平滑肌細胞組織預備液 ( x 00 ml) （8）小鼠膀胱平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟：
小鼠膀胱平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

小鼠腎小球內皮細胞*培養(yǎng)基花臉蘑 Lepista sordida

熱帶假絲酵母 Candida tropicalisSV-HUC-(人膀胱上皮永生化細胞)

毛木耳 Auricularia polytricha植物桿菌 Lactobacillus plantarum

人腎管狀上皮細胞*培養(yǎng)基人胃粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基

COLO 320DM(人結直腸腺細胞)kasumi-, 人白血病細胞株

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

金直絲鏈霉菌 Streptomyces aureorectus大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

人胚腎細胞C6(大鼠膠質瘤細胞)

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞爪哇根霉 Rhizopus javanicus

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae假單胞菌 Pseudomonas sp.

小鼠膀胱平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒說明書庚醛英文名稱：Enanthaldehyde分子式：4.8分子量： C7H4O：-7-7

4-反-乙環(huán)己溴分子式：267.208英文名稱：4- anti - ethyl cyclohexyl bromide：9538-82-8分子量： C4H9Br

8-溴-4-氯-2-甲喹啉分子式：256.53英文名稱：8- -4- chloride -2-：20-07-6分子量： C0H7BrClN

2-甲氧-3-硝-4-吡甲醛分子式：82.3英文名稱：2-, -3-, -4-, P, P：22349-76-4分子量： C7H6N2O4

三氟甲分子式：46.英文名稱：Three fluorine toluene：3605分子量： C7H5F3

3-羥-2,4,6-*（HTBA）英文名稱：3- hydroxy -2,4,6- three iodo benzoic acid (HTBA)分子式：55.8分子量： C7H3I3O3：53279-72-4

亮綠SF淡黃英文名稱：Light green SF分子式：792.85分子量： C37H34N2O9S3Na2：54-20-8

固藍B英文名稱：Solid blue B分子式：475.47分子量： C4H2CI2N4O2#：4263-94-6

N-(2-乙酰胺)-2-亞二乙(ADA)英文名稱：N- (2-) -2- two acetic acid (ADA)分子式：90.5分子量： C6H0N2O5：26239-55-4

N-(乙酰)-2-乙烷磺(ACES)英文名稱：N- (acetaminophen) -2- amino acid (ACES)分子式：82.9分子量： C4H0N2O4S：7365-82-4

注意事項：
. 接收到小鼠膀胱平滑肌細胞培養(yǎng)試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。