大鼠血管內(nèi)皮細胞試劑盒培養(yǎng)

注意事項：
. 接收到大鼠血管內(nèi)皮細胞試劑盒培養(yǎng)，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

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大鼠血管內(nèi)皮細胞試劑盒【Rat Vascular PrimaCell: Normal Vascular Endothelial Cells】
     大鼠血管內(nèi)皮細胞試劑盒培養(yǎng)血管是指血液流過的一系列管道。人體除角膜、毛發(fā)、指（趾）甲、牙質(zhì)及上皮等處外，血管遍布全身。按血管的構(gòu)造功能不同，分為動脈、靜脈和毛細血管三種。其中，血管內(nèi)皮細胞具有活躍的代謝功能,能夠生成和滅活多種生物活性物質(zhì)。大鼠血管內(nèi)皮細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 雖然血管內(nèi)皮組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的血管內(nèi)皮組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的血管內(nèi)皮組織能使得血管內(nèi)皮組織中內(nèi)皮細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將血管內(nèi)皮細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)大鼠血管內(nèi)皮細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的血管內(nèi)皮原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)大鼠的血管內(nèi)皮細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠血管內(nèi)皮細胞組織解離液（3×ml） （2）大鼠血管內(nèi)皮細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠血管內(nèi)皮細胞成纖維抑制劑ml（500x） （4）大鼠血管內(nèi)皮組織洗液(5 x 00 ml) （5）大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子（ml500X）及血清（5x0ml） （6）大鼠血管內(nèi)皮細胞基礎培養(yǎng)基(5 x 00ml) （7）大鼠血管內(nèi)皮組織預備液 ( x 00 ml) （8）大鼠血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書?

S00A5 抗體, 鼠單抗 ELISA   IF  ICC/IF    50 µg

CD46 / MCAM 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

p63 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB    50 µg

NEFH 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P    50 µg

Hemojuvelin / HFE2 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

Cadherin-8 / CDH8 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

GRIA2 / GLUR2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IP    50 µg

ICAM- / CD54 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM    25 Test

PSGL- / CD62 抗體 (PE), 兔單抗 FCM    25 Test

CRELD 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

大鼠血管內(nèi)皮細胞試劑盒培養(yǎng)性紅80英文名稱：Acid red 80分子式：468.46分子量： C24H7N2NaO5S：4478-76-6

4-溴-2,2-二吡分子式：英文名稱：4- -2,2- two：2365分子量：

木香烴內(nèi)酯英文名稱：Costunolide分子式：232.32分子量：C5H20O2：553-2-9

蒿本內(nèi)酯英文名稱：Artemisia this分子式：90.24分子量： C2H4O2：443-0-0

鹽酸喹啉分子式：65.62英文名稱：Hydrochloric acid：530-64-3分子量： C9H8ClN

2-氯-4--6，7-二甲氧喹唑啉分子式：239.66英文名稱：2- -4-, -6, 7- two：23680-84-4分子量： C0H0ClN3O2

弱性紅A英文名稱：Weak acid red A分子式：分子量：：

堿性紅HDC英文名稱：Alkaline red HDC分子式：分子量：：

3-(2'-甲)-H-吡唑分子式：58.998英文名稱：3- (2'- methyl phenyl) -H-：59843-49-分子量： C0H0N2

異煙分子式：37.5英文名稱：Isoniazid：54-85-3分子量： C6H7N3O

培養(yǎng)步驟：
大鼠血管內(nèi)皮細胞試劑盒培養(yǎng)對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。