大鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書

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大鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Rat kidney PrimaCell: Normal Renal Podocytes】
  大鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書腎是脊椎動(dòng)物的一種器官，屬于泌尿系統(tǒng)的一部分，負(fù)責(zé)過濾血液中的雜質(zhì)、維持體液和電解質(zhì)的平衡，后產(chǎn)生尿液經(jīng)由后續(xù)管道排出體外；同時(shí)也具備內(nèi)分泌的功能以調(diào)節(jié)血壓。在人體中，正常成人具備兩枚腎臟，位于腰部?jī)蓚?cè)后方。其中，大鼠腎足突細(xì)胞傳5代以上仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 雖然腎足突組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的腎足突組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的腎足突組織片能使得腎足突組織中細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將腎足突細(xì)胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)大鼠腎足突細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的腎足突原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 大鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)大鼠的腎足突細(xì)胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠腎足突細(xì)胞組織解離液(3×ml) （2）大鼠腎足突細(xì)胞組織處理緩沖液(00ml) （3）FibrOutTM大鼠腎足突細(xì)胞成纖維抑制劑 (ml（500x）) （4）大鼠腎足突細(xì)胞組織洗液(5 x 00 ml) （5）大鼠腎足突細(xì)胞生長(zhǎng)因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠腎足突細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(5 x 00ml) （7大鼠腎足突組織預(yù)備液 ( x 00 ml) （8）大鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書

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注意事項(xiàng)：
. 接收到大鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

培養(yǎng)步驟：
大鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

AFP / alpha-fetoprotein 抗體 (APC), 鼠單抗 FCM    25 Test

CD77 / PRV- / PRV 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

GCSH 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   IHC-P    50 µg

CQBP / HABP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IP    50 µg

SCGN / Secretagogin 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L 抗體, 兔單抗 WB   IF   IP  ICC/IF    50 µg

BCL2 / Bcl-2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µL

CD0 / Neprilysin / MME 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD2 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

ICOS Ligand / B7-H2 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM    25 Test

大鼠腎足突細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書硫酸鉻鉀分子式：499.4英文名稱：Potassium chromium sulfate：7788-99-0分子量： CrKO8S2.2H2O

,3,5-三異丙分子式：204.35英文名稱：,3,5- three ISO：77-74-8分子量： C5H24

2-溴---4-硝分子式：327.9英文名稱：2- -- -4-：749-4-6分子量： C6H3BrINO2

六羰鉬分子式：264英文名稱：Six carbonyl molybdenum：3939-06-5分子量： C6MoO6

4-氯-7-硝-2,,3-并氧雜惡二唑(NBD-Cl)英文名稱：4-, -7-, -2,,3-,, NBD-Cl, and oxygen, two分子式：99.55分子量： C6H2CLN3O3：099-89-0

(2B油）鄰氯對(duì)甲分子式：4.6英文名稱：(2B) ortho chlorine to amino toluene：95-74-9分子量： C7H8ClN； ClC6H3(CH3)NH2

-甲-5-乙氧羰吡唑分子式：英文名稱：- methyl -5- ethyl：97079-26-8分子量： C7H0N2O2

二脲分子式：242.28英文名稱：Two phenyl urea：40-22-7分子量： C3H4N4O； C6H5NHNHCONH

丙酸鉀分子式：2.7英文名稱：Potassium propionate：327-62-8分子量： C3H5KO2

人參皂苷Rb3英文名稱：Ginsenoside Rb3分子式：079.2685分子量：C53H90O22：68406-26-8