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Hela 299 (人宮頸癌細(xì)胞)
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| 報(bào) 價(jià)： | 1 |
Hela 299 (人宮頸癌細(xì)胞)正在出售的產(chǎn)品：CM-R019大鼠腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基人扁桃體上皮細(xì)胞HTEpiC Ishikawa, 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 胚肺細(xì)胞,2BS細(xì)胞 SNU-398(人肝癌細(xì)胞) MDCK 狗腎細(xì)胞 MIN6 小鼠胰島素瘤細(xì)胞 大鼠條紋神經(jīng)元(RNs)(1×106)
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
Hela 299 (人宮頸癌細(xì)胞)
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 人細(xì)胞系 |
商品介紹
組織來源 子宮頸；腺癌
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
參考資料(來源文獻(xiàn))
Hela 299細(xì)胞對脊髓灰質(zhì)病毒有一定抗性；Hela 299角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。 |
生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
推薦換液頻率 2~3次/周
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠鈣非依賴型0脂酶A2(iPLA2)檢測試劑盒 ，英文名： iPLA2 ELISA Kit
Pig two amine oxidase (DAO) ELISA Kit 豬氧化酶(DAO)檢測試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMCAb(Humanmelanocyteaibody)ELISAKit人黑色素細(xì)胞抗體
體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)活性比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitβ-EP馬β內(nèi)啡肽
BST2重組小鼠 TETHERIN / BST2 / CD317 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
半乳糖凝集素8(GAL8)重組蛋白 Recombinant Galectin 8 (GAL8)
IL22重組人 IL22 / IL-22 / Interleukin 22 蛋白 Protein
CD82 Protein Human 重組人 CD82 / KAI-1 蛋白
TNFSF13B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
AM (Adrenomedullin; ADM 0.1mgAM (Adrenomedullin; ADM) 腎上腺髓質(zhì)素(多肽抗原)
CD82 Protein Human 重組人 CD82 / KAI-1 蛋白
SLAMF6重組小鼠 SLAMF6 / Ly108 蛋白 Protein
TLR2 Protein Rat 重組大鼠 TLR2 蛋白
ENPP5重組人 ENPP5 蛋白 Protein
Hela 299 (人宮頸癌細(xì)胞)小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat high mobility group protein 1 (HMG-1) ELISA Kit 大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)檢測試劑盒
Humanadenosinedeaminase,ADAELISAKit 人腺苷脫氨酶(ADA)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickencarbonicanhydrase,CA檢測試劑盒雞酶(CA)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MouseHexokinase,HKELISAKit小鼠己糖激酶(HK)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠血管性血友病因子 英文名稱： von Willebrand Factor 規(guī)格： 英文縮寫： VWF
蠶多巴胺 英文名稱： Bombyx Dopamine 規(guī)格： 英文縮寫： DPA
英文名稱： Total Niic Oxide 規(guī)格： 英文縮寫： NO
骨橋素/骨橋蛋白 英文名稱： Osteopoin 規(guī)格： 英文縮寫： OPN
