小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-C4品牌

操作流程：
. 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-C4品牌主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-43），co2孵箱（日本yamato it-6）。
.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
.2. 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～0倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以×05/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%消化～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用0×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×04。
.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于2個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×00％，計(jì)算貼壁率。 
.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以×04/孔接種于24孔板，每孔加入ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)0d，繪制細(xì)胞生長曲線

本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-C4品牌說明書！

細(xì)胞名稱 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-C4品牌
形態(tài)特性 克隆樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 裸鼠移植實(shí)驗(yàn)證明可向三個(gè)胚層分化。

培養(yǎng)條件 KO-DMEM + 5% FBS + 03U/ml LIF + 2mM L-Glu + % NEAA + 0.M β-Mer

傳代方法 :0傳代；3~4天傳代一次

傳代情況

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）

STR -

同工酶

染色體

主要功能：
（）小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-C4品牌血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）表達(dá)鈣通道及ICAM-和VCAM-，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
 生理變化：
（）主動(dòng)脈硬化。
（2）主動(dòng)脈瘤
（3）主動(dòng)脈鈣化。
基本特性：
（）小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-C4品牌組織來源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
（2）鑒定：肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每凍存管細(xì)胞數(shù)：>5×05 cells/ml。
（5）肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）不含有HIV-、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

運(yùn)輸和保存：
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-C4品牌視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
)mL凍存細(xì)胞懸液裝于.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存?zhèn)€月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
具體操作：
.預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱。
2.用75％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。
3.正確擺放使用的器械：保證足夠的*作空間，不僅便于*作而且可減少污染。
4.點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小。
5.準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶，放入微波爐內(nèi)高火，8分鐘再次消毒。
6.取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液：大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞取出已經(jīng)預(yù)熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)。
7.從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞：注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細(xì)胞。
8.打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒。?

櫟櫻酸 CAS 682-8-3 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支

粗莖堿甲 CAS 79592-9-9 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%,5mg/支；

吳茱萸內(nèi)酯 CAS 6989-38-4 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

秦皮素;Fraxetin CAS 574-84-5 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

甲 CAS 6037-06-6 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/支

3-去羥基印烏堿 CAS  訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

五水合酸司巴丁；五水合酸金雀花堿；五 CAS 556278 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

狗牙花堿D CAS 988-37-3 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

DL-薄荷醇 CAS 5356-70-4 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

羥基積雪草酸 CAS 8449-4-7 訂購|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

α-三聯(lián) CAS 08-34- 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

α-倒捻子素 CAS 5549 訂購|咨詢  規(guī)格： 20mg

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-C4品牌FRMD4A  FRMD4A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

PCDH8  原鈣粘附蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-chicken IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.ml

MYCBP2  MYC結(jié)合蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Acetyl-Histone H2B(K5)  乙酰化組蛋白H2B抗體 規(guī)格: 0.ml

Phospho-DBC (Thr454)  磷酸化膀胱缺失基因抗體 規(guī)格: 0.ml

Ubiquitin/UBC/UB  泛素蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

ALS2CR4  肌萎側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

PROK2/Prokineticin 2  前動(dòng)力蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.ml

FGF6  成纖維細(xì)胞生因子6抗體 規(guī)格: 0.2ml

Laminin 2 alpha  層粘蛋白α2抗體 規(guī)格: 0.2ml